TLCS法測定熊膽中熊去氧膽酸及鵝去氧膽酸含量

(1)供試品：熊科動物棕熊UrsusarctosLinnaeus或黑熊SelenarctosthibetanusG.Cuvier的干燥膽。

(2)色譜條件：高效硅膠薄層板(煙臺)；異辛烷-異丙醚-冰醋酸-正丁醇-水(6：3：3：1.8：0.6)為展開劑；飽和硫酸氫銨的5%硫酸乙醇溶液為顯色劑，噴霧顯色，于110℃加熱10min，在自然光下和365nm紫外光燈下檢視斑點的位置。

(3)對照品溶液的配制：精密稱取熊去氧膽酸、鵝去氧膽酸、膽酸對照品，用甲醇溶解并制成每毫升各含1mg的溶液作為對照品溶液。

(4)樣品溶液的制備：精密稱取熊膽8mg，加30%氫氧化鈉溶液1.5ml，于沸水浴中水解10h。用濃鹽酸調pH1～2，乙酸乙酯提取(10ml×2次，5ml×2次)，合并提取液，濃縮，定容于2ml量瓶中，作為樣品溶液。

(5)測定：吸取樣品溶液1μl與對照品溶液1μl和2μl，分別交叉點于同一薄層板上，按上述薄層色譜條件，展開，取出，晾干，顯色。照薄層掃描法進行反射鋸齒法掃描；熊去氧膽酸的激發波長λex＝380nm，發射波長λem＝450nm；鵝去氧膽酸和膽酸的λem＝470nm，λex＝550nm。測量樣品與對照品吸收度積分值，計算，即得。