本品在105℃干燥2h后，定量鹽酸硫胺素（C₁₂H₁₇ClN₄OS·HCl）的含量為98~102%。

1．性狀

本品為白色的微細結晶或結晶性粉末，無臭，或稍有特異性臭氣①。

2．鑒定試驗

（1）取本品5mg，溶于0.5mol/L氫氧化鈉溶液5mL和鐵氰化鉀試液0.5mL的混合液中，加異丁醇5mL，用力振蕩2min，放置，溶液分為兩層，從上方用紫外線照射，從與照射方向成直角的位置觀察上層液的上部時，可見到藍紫色的熒光。此熒光在溶液變成酸性時消失，變為堿性時則再現②。

(2)本品的水溶液（1→50）加氯化汞試液產生白色，加碘液產生紅褐色，加碘化汞鉀試液帶黃白色，加苦味酸試液產生黃色沉淀或混濁③。

（3）取本品5mg，溶于醋酸鉛試液1mL和氫氧化鈉溶液（1→10）1mL的混合液中，溶液呈黃色，在水浴上加溫呈褐色，放置后，產生黑褐色的沉淀④。

（4）本品呈氯化物的常規鑒定試驗反應⑤。

3．純度試驗

（1）溶解性  將本品1g溶于水至10mL時，溶液顏色不應深于在0.05mol/L重鉻酸鉀溶液1.5mL中加水至100mL的溶液的顏色⑥。

（2）酸堿性  本品水溶液（1→100）的pH值應在2.7~3.4之間。

（3）硫酸鹽  取本品0.5g，進行硫酸鹽的常規試驗時，其量在0.005mol/L硫酸0.5mL對應量以下⑦。

（4）氫溴酸鹽  將本品7mg溶于0.1mL水中，取1滴放到小瓷皿上，加一滴熒光素試液，然后加冰醋酸及過氧化氫等容易混合液1滴，充分混合后，置于水浴上蒸發至干，殘渣不得呈現紅色⑧⑨。

4．干燥失重

本品在105℃干燥2h，失重必須在5%以下⑩。

5．強熱殘留物

本品的強熱殘留物必須在0.2%以下 。

6．定量法

本品在105℃干燥2h后，精確稱量約0.1g，溶于0.001mol/L鹽酸中至1000mL，取2mL加0.001mol/L鹽酸至100mL，此液分別加到A、B兩個帶塞的離心管中，每支加2mL，將標準鹽酸硫胺素溶液加到C、D兩個帶塞的離心管中，每支2mL。然后在A、B、C、D中分別加氯化鉀·鹽酸試液3mL。A及C管中分別加溴化氰試液3mL，振蕩混合后分別迅速加入氫氧化鈉溶液（3→10）2mL，混合振蕩，再準確地各加入異丁醇15mL，密封，用力混合振蕩2min。在B及D管中分別加氫氧化鈉溶液（3→10）2mL，溴化氰試液3mL，混合振蕩，再準確地各加入異丁醇15mL，密封，用力振蕩2min。把A、B、C、D管緩慢地分離2min后，將每管異丁醇層分別轉移到另外的試管中，分別緩慢地加入無水硫酸鈉1g，緩慢地振蕩混和，放置，取澄清的異丁醇層。在各異丁醇液的激發波長約370nm處，最大吸收峰的波長約440nm處，測定每管異丁醇層發出的熒光強度，分別以a、b、c、d代表其值，利用下式求出含量 。

注  解

①本品一般是單斜晶系的針狀或板狀結晶的α型，β型是斜方晶系的微細針狀晶，味苦，純品無臭，一般因含微量硫黃的分解產物有米糠臭氣。mp（分解）約248℃，干燥狀態在空氣中穩定，對熱穩定（約170℃），但易吸濕，長期保存時慢慢分解著色。在水溶液中，在pH2~4范圍內比較穩定，可是在堿性下不穩定。紫外線可使其分解。

本品1g可溶于1mL水中。在甲醇、乙醇、丙酮中對應其含水率溶解度增大。不溶于醋酸乙酯、丁醇、苯、氯仿中。

②是硫胺素特有的硫化物反應。在硫胺素中加入堿性鐵氰化鉀溶液產生熒光物質的硫胺熒（Thioohrome），此化合物溶于異丁醇層中。

③是根據氨基或者季銨鹽基生物堿類似的反應，可是在稀薄溶液中不明顯。

④調成堿性時，則噻唑壞斷裂，將從巰基脫下的S離子做為硫化鉛檢出。

⑤是鹽酸鹽的反應。

⑥檢驗呈色性不純物質的限量。FCC的規定也一樣。

⑦是合成反應過程中混入的不純物質，SO₄允許限量是0.05%。

⑧檢驗反應中間體氫溴酸鹽。氫溴酸與過氧化氫反應，溴游離，遇熒光素，生成曙紅產生紅色。

⑨FCC中，有硝酸鹽的規定。關于溶液性質，硫酸鹽及氫溴酸鹽沒有規定。

⑩放置在空氣中吸收水分約變成4%。在FCC為5%以下（105℃，2h）

FCC也是0.2%以下。

在硫胺素中加溴化氰和堿時，氧化產生具有藍紫色熒光的硫胺熒。將硫胺熒轉移到異丁醇中，對其熒光強度和標準品進行比較定量。