白藜蘆醇和白藜蘆醇苷的含量的測定 — HPLC-UV
儀器設備:
儀器設備 waters 2690液相色譜儀(包括梯度泵、自動進樣器等);
色譜條件
色譜柱:lichrospher c18 ( 2. 1 mm ×250 mm)
流動相a: 5%甲醇- 1%乙酸
流動相b: 80%甲醇-1%乙酸,梯度洗脫:0~40 min,a線性變化到b;
流速0. 3 ml•min- 1;
柱溫30℃,
進樣量5μl;
檢測波長305 nm。
試樣制備: 對照品溶液制備精密稱取白藜蘆醇和白藜蘆醇苷對照品適量,用95%乙醇分別制成0.099mg•ml-1和0. 480 mg•ml-1的溶液。精密吸取白藜蘆醇和白藜蘆醇苷各10 ml于25 ml量瓶中,制成白藜蘆醇和白藜蘆醇苷混合標準溶液供試品溶液的制備精密稱取虎杖粉末(過30目篩)約0.5 g,置于索氏提取器中,加入95%乙醇30 ml,提取至無色,將提取液移至50 ml量瓶中,用95%乙醇定容至刻度,搖勻,0. 45μm微孔濾膜過濾,取續濾液備用。
應用范圍
該法準確、簡便,重現性好,適用于虎杖中白藜蘆醇和白藜蘆醇苷的定量分析
方法原理
取本品加95%乙醇索提,經色譜分離,在305nm下測定峰面積,外標法計算其含量
試樣制備
對照品溶液制備精密稱取白藜蘆醇和白藜蘆醇苷對照品適量,用95%乙醇分別制成0.099mg•ml-1和0. 480 mg•ml-1的溶液。精密吸取白藜蘆醇和白藜蘆醇苷各10 ml于25 ml量瓶中,制成白藜蘆醇和白藜蘆醇苷混合標準溶液供試品溶液的制備精密稱取虎杖粉末(過30目篩)約0.5 g,置于索氏提取器中,加入95%乙醇30 ml,提取至無色,將提取液移至50 ml量瓶中,用95%乙醇定容至刻度,搖勻,0. 45μm微孔濾膜過濾,取續濾液備用。
操作步驟
精密吸取對照液以及供試品溶液5μL,分別注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積。以外標法計算其含量