原花青素生產工藝
1.植物提取法
1.1提取目前,普遍采用的工藝是先脫脂的方法包括壓榨法、溶劑法、超臨界CO2萃取法,其中,超臨界CO2萃取法最佳,不僅油脂提取率高,而且對原花青素的破壞作用最小,質量較好。
1.2分離純化原花青素單體物質通常采用柱色譜進行分離,其中,聚酰胺、SephadexLH-20和ToyopealHW-40是最有效的填料。對于較難分離或需要量較小的化合物,可用半制備反相高效液相色譜法(RP-HPLC)和正相高效液相色譜法(NP-HPLC)制備。隨聚合度的增加,原花青素的同分異構體數目呈幾何級數遞增,分離純化這類大分子的單體物質非常困難。對于多聚體,可將其按分子量(聚合Chemicalbook度)大小分段。目前,已建立起來的分級方法有溶劑沉淀法和多種色譜法,如薄層色譜法、正相高效液相色譜、凝膠排阻色譜、逆流色譜法等。
2.生物合成法由硼氫化鈉作為還原劑還原(2R,3R)-二氫-3′,4′,3,5,7-五羥黃烷的主要產物是白矢車菊素(Leucocyanidin)的2,3-反-3,4-反異構體,而酶的還原產物是2,3-反-3,4-順異構體。在微酸的條件下,3,4-反異構體可能部分地轉化為3,4-順異構體。3,4-順異構體相對于3,4-反異構體較偏酸性,并且易于同硫醇和二醇還原酶反應。酶合成要求的條件比較苛刻,同時也存在一個順反異構體的問題,目前,此法還不太成熟。