1.氯乙酸鈉法由氯乙酸配制成氯乙酸鈉，再與水合肼反應生成肼抱二乙酸，然后在亞硝酸鈉作用下制得亞氨基二乙酸。
（1）氯乙酸鈉的制備將氯乙酸溶解于水，在攪拌下緩緩加入碳酸鈉，直至溶液中的氣體逸盡，即得氯乙酸鈉。
（2）肼抱二乙酸的制備在攪拌下將氯乙酸鈉溶液滴加到50%的水合肼中，反應溫度不得超過25℃。加完后保溫10min，反應物的pH值應在9-10之間。然后加入碳酸鈉，控制溫度為20-25℃。加畢，將溫度升至65-70℃，保溫1h。然后冷至室，用鹽酸酸化析出白色固體，過濾，水洗，于60℃干燥，得肼抱二乙酸，熔點166-167℃。將肼抱二乙酸加入水中，在攪拌下緩緩加入16%的亞硝酸鈉溶液，然后再加入濃鹽酸，在25℃反應1.5h。將反應液蒸發濃縮至原體積的1/3，放置析出結晶，過濾，于60℃干燥，得亞氨基二乙酸。
2.用氫氰酸直接合成。將氫氰酸、烏洛托品和甲醛混合水溶液在管式反應器中反應，得到亞氨基二乙腈。
3.氯乙酸和氨基乙酸法。
4.氨基乙酸和乙醇腈法。
5.氯乙酸和氨反應法。
6.在反應釜中加入粉狀氫氧化鈣、25％氨水，在攪拌下慢慢加入氯乙酸溶液，溫度控制在(50±5)℃，加完氯乙酸后在該溫度保持反應3h，再升溫到80℃，滴加鹽酸，加完后升溫至95～100℃反應15min，冷卻，將反應物移至結晶釜，結晶得產品。
反應方程式：ClCH2COOH+Ca(OH)2+NH4OH→NH(CH2COO)2Ca+3H2O
NH(CH2COO)2Ca+3HCl→NH(CH2CO()H)2·HCl+CaCl2
也可用二乙醇胺在催化劑存在下脫氫而制得亞氨基二乙醛，然后與堿反應，一部分生成亞氨基二乙酸鈉，一部分還原成二乙酸胺，如此反復反應使二乙酸胺全部生成亞氨基二乙酸。
現在較為先進的方法就是二乙醇胺法。