丁二酸除存在于琥珀外，還廣泛存在于多種植物、動物的組織中。工業制法較多，主要有以下幾種：
1.氧化法石蠟經氧化生成各種羧酸的混合物，分離后可得丁二醇。
2.加氫法順丁烯二酸酐或反丁烯二酸在催化劑作用下加氫反應，生成丁二酸，然后經分離得到成品。催化劑為鎳或貴金屬，反應溫度約為130-140℃。
3.丙烯酸羰基合成法丙烯酸和一氧化碳在催化劑作用下，生成丁二酸。尚未工業化。
4.電解氧化法苯酐與硫酸和水按1：0.5：4比例，在陶瓷電解槽中電解，可得丁二酸。
5.乙炔法乙炔與一氧化碳及水在[CO(CO)4]催化劑存在下。反應溫度80-250℃，壓力2.94-49.03MPa，于酸性介質中反應可得丁二酸。