以新鮮豬膽汁為原料豬膽汁酸的制備取新鮮豬膽汁，加飽和石灰水上清液加熱至沸制備膽紅素鈣鹽，母液趁熱加鹽酸酸化至剛果紅變藍，析出結合豬膽汁酸的黑色膠狀沉淀，除去乳狀液，收集沉淀物，加自來水沖洗后變硬變脆，得豬膽汁酸。

豬膽汁[飽和石灰水]→[pH11-12,100℃]母液[HCl]→沉淀物[水]→豬膽汁酸粗品的制備取粗制豬膽汁酸，加1.5倍質量的氫氧化鈉，加9倍量體積的水，加熱16h以上，冷卻，靜置分層，傾出上層淡黃色液體，沉淀物加少量水溶解，加稀鹽酸或硫酸(2：1)酸化至剛果紅試紙變藍，取出析出物，過濾，水洗至中性，呈金黃色，真空干燥，得粗品。

豬膽汁酸[NaOH,水]→[>16h]皂化液[HCl]→粗品異去氧膽酸成品的制備取粗品，加5倍量乙酸乙酯，加150-200g/L活性炭，加熱攪拌回流溶解，放冷，過濾，濾渣加3倍量乙酸乙酯回流，過濾，合并兩次濾液，加200g/L無水硫酸鈉，過濾，得濾液。濃縮至原體積的1/5-1/3，放冷，析出晶體，抽濾，得結晶，用乙酸乙酯洗滌，真空干燥，得異去氧膽酸成品。

粗品[乙酸乙酯，活性炭]→濾液[無水Na2SO4]→濾液→結晶[乙酸乙酯]→異去氧膽酸成品。