L-天冬氨酸(cas56-84-8)主要用酶法生產。用L-天冬氨酸酶作用于延胡索酸(反丁二酸)和氨，即生成L-天冬氨酸。
菌種培養 大腸桿菌 (Eschrichia coli)Asl．881的培養。普通肉汁培養基為斜面培養基，插瓶培養基其組成為：玉米漿7.5％，延胡索酸2.0%，MgSO4·7H2O 0.02%將溶液用氨水調pH至6.0，煮沸過濾后，與500ml錐形瓶中裝入培養基50-100ml。 取新鮮斜面上或液體中的培養種子，接種與搖瓶培養基中，于37℃下振搖培養24h，逐級擴大培養至1000-2000L規模后，用1mol/L的HCl調pH至5.0，保溫45℃ 1h 后，冷卻至室溫，于轉筒式高速離心機內離心，收集含有天冬氨酸酶的菌體。
固定化天冬氨酸酶，制成生物反應器取E.Coli濕菌體20kg，懸浮于離心后的培養清液80L中(或80L生理鹽水)，保溫40℃再加入90L保溫40℃的12%明膠溶液和1.0%的戊二醛溶液，充分攪勻后，放置冷卻凝固，再放人0.25%戊二醛溶液中浸泡，于5℃過夜后，再切成3-5 mm3大小的小塊，并將其浸泡在0.25%戊二醛溶液中5℃過夜，再取出以蒸餾水洗滌，濾干，得含天冬氨酸酶的固定化E.Coli， 將其裝填到填充式生物反應器中，備用。
轉化 取保溫37℃的1 mol/L延胡索酸銨(含1mmol/L MgCl2，pH8.5)底物的溶液，以一定的空間速度(SV)連續流過生物反應器，控制最大轉化率大于95%，得轉化液。
制取粗品及精制 將轉化液漸加入1 mol/L的HCl，調pH至2.8，在保持5℃下放置過夜結晶, 濾取結晶, 用水洗滌，濾干, 于105℃干燥，得L-天冬氨酸粗品。再將粗品用稀氨水重結晶，先以氨水溶解成15%的溶液 (pH5.0)再加入1%活性炭，加熱70℃攪拌脫色1h后, 趁熱過濾去渣，取濾液冷卻, 保溫5℃過夜結晶, 過濾取結晶, 85℃真空干燥，即得L-天冬氨酸成品。