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    鳥苷酸二鈉質量檢測

    非售品
    CAS:5550-12-9
    分子式:C
    分子量:407.19

    本品在定量時含鳥苷5’-磷酸二鈉(C10H12N5Na2O8P)97~102%。
    1.性狀
    本品為無色~白色的結晶,白色的結晶性粉末或粉末,有特殊的味①。
    2.鑒定試驗
    (1)取本品20mg,加0.01mol/L鹽酸100mL,溶解。取10mL,加0.01mol/L鹽酸定容至100mL,其溶液在波長265±2nm中有極大吸收峰和在波長270nm和280nm處有特殊的吸收峰②。
    (2)取本品的水溶液(3→710,000)3mL加二羥基甲基乙醇溶液(1→10)0.2mL,然后加硫酸鐵銨鹽酸溶液(1→1,000)3mL,在水浴中加熱10min時呈綠色③。
    (3)取本品水溶液(1→100)5mL,當加氧化鎂2mL時不生成沉淀。再加硝酸7mL加熱煮沸10min后加氫氧化鈉試液中和,此時溶液呈磷酸鹽的常規鑒定試驗反應④。
    (4)本品呈鈉鹽的常規鑒定試驗反應⑤。
    3.純度試驗
    (1)溶解性  將本品0.1g溶于10mL水時,無色,其濁度應在透明以下。
    (2)酸堿性  本品的水溶液(1→20)的pH值,用玻璃電極法測定,應是7.0~8.5。
    (3)銨鹽  將本品0.1g裝入小試管,加氧化鎂50mg及水1mL,在試管內懸吊用水潤濕的紅色石蕊試紙,蓋好試管塞,在水浴上加熱5min,石蕊試紙不應變藍⑥。
    (4)砷  取本品0.5g,加水5mL,作為檢液,進行砷的常規試驗時應符合要求⑦。
    (5)重金屬  將本品2g靜置加熱炭化后,用不超過500℃的溫度灰化,加鹽酸2mL,在水浴上蒸發至干,在殘留物中加稀醋酸4mL和水20mL溶解,進行過濾,濾紙上的殘留物每次用5mL水洗,共洗3次,將洗液合并到濾液中,加水定容至50mL。取25mL作為檢液,進行重金屬的常規試驗,其量應在0.002%以下⑧。
    (6)氨基酸  取本品的水溶液(1→1,000)5mL,加茚三酮試液1mL,加熱3min時不應顯色⑨。
    (7)吸光率  本品的0.01mol/L鹽酸溶液(1→50,000)的波長250nm、260nm及280nm的吸光率測定為A1、A2和A3時,A1/A2是0.95~1.03,A3/A2應是0.63~0.71⑩。
    (8)引用其它核酸分解物“5’-肌苷酸鈉“的純度試驗(8) *
    4.干燥失重
    將本品在120℃干燥4h,其失重應在25%以下 *
    5.定量法
    精確稱取本品約500mg,加0.01mol/L鹽酸定容至1,000mL,然后取此液10mL,加0.01mol/L鹽酸定容至250mL作為檢液。將0.01mol/L鹽酸為對照,在液層的長度10cm,波長260nm條件下測吸光率A,根據下式可求出鳥苷-5’-磷酸二鈉的含量 *
     
    注  解
    ①本品有特殊的鮮味,與L谷氨酸鈉共存,其鮮味明顯增強,本品易溶于水,幾乎不溶于乙醇以及其它有機溶劑。
    ②對鳥苷酸的鑒定。鳥苷酸在0.01mol/L鹽酸溶液中紫外部吸收λmax是265±2nm。從波長270nm到280nm是稍微平坦的吸收帶。鳥苷酸的紫外部吸收是由于其堿基的鳥嘌呤π電子的遷移所致,與鳥嘌呤自體的吸收光譜不同。鳥苷也具有同樣吸收譜。
    ③、④、⑤(→同5’-核糖核苷酸鈉)。
    ⑥NH3的檢測界限是約20μg。
    ⑦As2O3為2ppm以下。
    ⑧本品在醋酸酸性中膠化,所以灰化處理后進行試驗。限度為20ppm。
    ⑨檢測限量是1μg。
    ⑩對其它紫外線吸收物的混入加以限制。
     本品的Rf值是0.12,鳥苷及鳥嘌呤分別是0.68和0.75。鑒定限量分別為01和0.05μg。
     利用費雪滴定法定量是困難的,所以用干燥失重法進行定量,本品含4~7分子的結晶水,對應的理論值是15.04~23。65%。
    * 289.8是在鳥苷酸的λ260nm的吸光率 ,對應吸光系數11800。
    將(1)和(2)式及干燥物含量補充項組合得到此式。
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