甘草次酸的測定—毛細管區帶電泳法

儀器設備

儀器設備： 1 儀器
1.1毛細管電泳儀
1.2 毛細管柱：;石英毛細管65cm×75μm i.d. ,有效長50cm
1.3 紫外檢測器
2 毛細管電泳條件
2.1 緩沖液：50mmol/l 硼砂溶液
2.2電壓：14kv
2.3 檢測波長：228nm
2.4重力進樣10s (高度7cm)

試樣制備：
1.對照品溶液的制備
精密稱取甘草次酸化學對照品7. 6mg，置50ml 量瓶中，用50mmol/l硼砂溶液定容至刻度，超聲20min作對照品溶液。
2.氫氯噻嗪溶液的制備
精密稱取氫氯噻嗪0.2537g ，置250ml 量瓶中,用甲醇定容至刻度,搖勻,即得。
3. 標準溶液的制備
精密取對照品溶液適量,置10ml量瓶中,加入氫氯噻嗪溶液1. 0ml ,用50mmol/l硼砂溶液(含體積分數10 %甲醇) 定容至刻度，搖勻，配成濃度為0. 0304 、0. 0608 、0. 0912、0. 1216、0.1520 g/l，作為繪制標準曲線的系列濃度標準溶液。
4.供試品溶液的制備
精密稱取甘草浸膏粉約0. 113g ,置50ml 量瓶中, 另精密加入氫氯噻嗪溶液5. 0ml , 用50mmol/l硼砂溶液(含體積分數10 %甲醇) 定容至刻度，,超聲30min，濾過即得。
注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。
 
應用范圍
本方法采用毛細管區帶電泳法測定甘草浸膏粉里甘草次酸的含量。
本方法適用于中藥制劑甘草浸膏粉。
 
方法原理
用毛細管區帶電泳法,紫外檢測波長228nm ,電壓14kv ,以50mmol/l硼砂溶液為背景電解質,氫氯噻嗪為內標,對甘草浸膏粉中的甘草次酸進行定量分析。
 
試劑
1. 硼砂
2. 甘草次酸化學對照品
3. 氫氯噻嗪
 
試樣制備
1.對照品溶液的制備
精密稱取甘草次酸化學對照品7. 6mg，置50ml 量瓶中，用50mmol/l硼砂溶液定容至刻度，超聲20min作對照品溶液。
2.氫氯噻嗪溶液的制備
精密稱取氫氯噻嗪0.2537g ，置250ml 量瓶中,用甲醇定容至刻度,搖勻,即得。
3. 標準溶液的制備
精密取對照品溶液適量,置10ml量瓶中,加入氫氯噻嗪溶液1. 0ml ,用50mmol/l硼砂溶液(含體積分數10 %甲醇) 定容至刻度，搖勻，配成濃度為0. 0304 、0. 0608 、0. 0912、0. 1216、0.1520 g/l，作為繪制標準曲線的系列濃度標準溶液。
4.供試品溶液的制備
精密稱取甘草浸膏粉約0. 113g ,置50ml 量瓶中, 另精密加入氫氯噻嗪溶液5. 0ml , 用50mmol/l硼砂溶液(含體積分數10 %甲醇) 定容至刻度，,超聲30min，濾過即得。
注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。
 
操作步驟
1.標準曲線的繪制
取上述標準溶液在毛細管電泳儀上進樣10s，記錄電泳圖10μL注入高效液相色譜儀，用紫外檢測器測定甘草次酸的吸收度，以標準溶液濃度對峰面積繪制標準曲線，進行線性回歸，得到回歸方程。
2. 供試品的測定
取上述供試品溶液在毛細管電泳儀上進樣10s，用紫外檢測器測定甘草次酸的吸收度，計算出其含量。