反相高效液相色譜法測定L-苯甘氨醇

1、儀器與試劑
　　ShimadzuLC-6A高效液相色譜儀，配有LC-6A高壓輸液泵；SPD-6AV紫外可見檢測器(檢測器波長:254nm)；CTO-6A柱溫箱；SCL-6B系統控制器(均為日本島津公司)；HypersilODS2色譜柱:4。6mm×250mm，大連依利特)；超聲波發生器；TL9900色譜數據工作站。

L-苯甘氨醇(分析純)，L-苯甘氨醇合成樣品，二次蒸餾水，乙腈(色譜純)，三乙胺、Vc(均為分析純)。流動相:水-乙腈-三乙胺；流速:1mL/min；柱溫:40℃。

2內標法
2.1溶液的配置
  精確稱量125.1mg(準確至0.1mg)維生素C，用流動相溶解，移入50mL容量瓶中，定容至刻度，搖勻，得內標物溶液，備用；精確稱量250.3mg(準確至0。1mg)L-苯甘氨醇標準品，用流動相溶解，移入50mL容量瓶中定容至刻度，搖勻，得標準儲備液，備用；精密稱取合成L-苯甘氨醇樣品(準確至0。1mg)，置于10mL容量瓶中，分別加入1mL內標物，用流動相定容至刻度，搖勻，備用。

配制的標準溶液，在選定的實驗條件下，分別進樣5μL，測得內標物及樣品峰面積(平行測定5次)。

2。2線性關系
分別精密量取0.5，1，2，4，8mL標準儲備液于10mL容量瓶中，各加入1mL內標物，定容配制系列標準溶液，備用。

3外標法
3.1標準溶液的配制
先用流動相配制1.000g/L的L-苯甘氨醇標準溶液，精密吸取1，2，4，6，8，10mL于10mL容量瓶中，然后用流動相稀釋至刻度，得系列標準溶液，搖勻，備用。
3.2樣品溶液配制
分別稱取4份合成的L-苯甘氨醇4.0mg左右，用流動相配成10mL溶液，分別取20μL進樣分析。

配制的標準溶液，在選定的實驗條件下，分別取20μL(定量管)進樣分析。